Hühnereier - 2. Preis 2012 (Produkte) - Stiftung Warentest

Verfahren zur Charakterisierung der biologischen Aktivität von Helminth-Eiern, nämlich von Trichuris Eiern A method of characterizing the biological activity of helminth eggs, namely of eggs Trichuris Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bestimmung der biologischen Aktivität von Helminth-Eiern, nämlich von Trichuris Eiern, bevorzugt Trichuris suis Eiern, in verschiedenen Stadien ihres Lebenszyklus.

The present invention relates to a method for determining the biological activity of helminth eggs, namely of Trichuris eggs, preferably Trichuris suis eggs, in various stages of their life cycle. Das Verfahren ermöglicht, Präparationen von Helminth-Eiern, als wirksame Bestandteile therapeutischer Arzneimittel, kontrolliert herzustellen und eine sichere und therapeutisch effiziente Anwendung am Menschen zu gewährleisten. The method enables to produce preparations of helminth eggs, as effective components of therapeutic drugs, controlled, and to ensure a safe and therapeutically effective use in humans.

Mittel gegen Parasiten kaufen in der Ukraine solche Aktivierung beeinflusst auch das Auftreten und den Verlauf von Autoimmunkrankheiten. Such activation also affects the occurrence and the course of autoimmune diseases. Epidemiologische Studien zeigen, dass in Regionen mit hohen Raten von Wurminfektionen Autoimmunerkrankungen seltener sind als in Regionen, in denen auf Grund besserer hygienischer Verhältnisse diese infektionsraten niedriger sind.

Epidemiological studies show that in regions with high rates of worm infections autoimmune diseases are less common than in regions in which these infection rates are lower due to better hygienic conditions.

According to recent studies of people with Trichuris suis infection seems to be only transient and the worms are obviously repelled before they can reproduce. Gleichwohl deuten die positiven klinischen Studien zum Einsatz von Trichuris suis bei chronisch entzündlichen Darmerkrankungen darauf hin, dass diese transiente Infektion des Menschen eine therapeutisch wirksame Modulation des Immunsystems auslösen kann Summers et al. Helminth-Eier, die für therapeutische Anwendungen vorgesehen sind, lassen sich als biologische Arzneimittel klassifizieren.

Helminth eggs that are intended for therapeutic applications, can be classified as biological medicinal products. A key parameter that needs to be tested wo für helminth Eier getestet manufacture and application of biological medicines, wo für helminth Eier getestet biological activity, which is Arten von Würmern und Behandlung a measure of the therapeutic effectiveness of the drug.

Ohne Analyse der biologischen Aktivität lässt sich weder der Herstellungsprozess rational entwickeln und überwachen, noch kann man bei der geplanten Anwendung im Menschen die für den therapeutischen Effekt notwendige und den Patienten verlässliche Dosierung des Arzneimittels festlegen. Without analysis of the biological activity can be neither the manufacturing process rationally develop and monitor, nor can one determine the necessary for the therapeutic effect and the patient reliable dosage of the drug at the proposed use in humans.

Aus diesem Grunde lassen sich nur solche Helminth-Ei- Präparationen sicher und effektiv als Wo für helminth Eier getestet einsetzen, deren biologische Aktivität hinreichend qualifiziert ist. For this reason, only those helminth egg preparations can safely and effectively be used as drugs, their biological activity is sufficiently serious. Die Bestimmung der Embryonierungsrate Kringel et al. Previously available for Trichuris eine Tablette von Würmern nur für Katzen three analytical methods are wo für helminth Eier getestet, but only inadequately characterize the biological activity.

The investigation is carried out microscopically. Aus der morphologischen Beurteilung allein lässt sich jedoch wo für helminth Eier getestet Gegensatz zu der in dieser Anmeldung dargestellten molekularbiologischen Methode wo für helminth Eier getestet zweifelsfrei ableiten, ob die Larven tatsächlich vollständig embryoniert sind.

From the morphological evaluation alone can however, Prävention von Würmern bei Kindern 2 Jahre contrast to the molecular biological method presented in this application not be inferred with certainty that the larvae are actually completely embryoniert.

Zudem bedarf die morphologische Beurteilung der Erfahrung des Beobachters und die subjektive Einordnung von morphologischen Grenzfällen limitiert die Richtigkeit und Präzision dieser Methode. In addition, the morphological assessment of the experience of the observer and the subjective classification of morphological borderline cases requires limited the accuracy and precision of this method.

Die Bestimmung der Infektionsrate: Für Trichuris suis erfogt die Untersuchung im Schwein. Determination of the infection rate: For Trichuris suis erfogt the investigation in Pig. Zu einem bestimmten Zeitpunkt nach Infektion wird die Anzahl der in der Darmschleimhaut etablierten Larven bestimmt und in Relation zur applizierten Dosis an TSO gesetzt Kringel et al. The problem with determining the rate of infection, that they are not solely dependent on the functionality of the helminth eggs, but equally of individual host factors, such as the immune system, the intestinal flora and intestinal function of animals.

Die Bestimmung der Infektionsrate im Versuchstier ist also intrinsisch mit einer hohen Variabilität verbunden und lässt sich aufgrund des natürlichen Testssystems nicht standardisieren, welches die Eignung als biologischer Aktivitätstest stark einschränkt. The determination of the rate of infection in the test animals is thus linked intrinsically with high variability and can not be standardized because of the natural test wo für helminth Eier getestet, which greatly restricts the suitability as a biological activity test.

Weiterhin beschreibt Kringel et al. Further describes kringle et al. There is no direct quantitative relationship, from which could be close to the number of eggs in the feces on the rate of infection or the biological wo für helminth Eier getestet of adult larvae.

Die Methode von Kringel et al. The method of kringle et al. Die beschriebenen Verfahren sind jedoch nicht ausreichend, um die biologische Aktivität von Helminth-Ei-Präparationen mit der für medizinische Produkte erforderlichen Genauigkeit zu bestimmen.

However, the methods described are not sufficient to determine the biological activity of helminth egg preparations with the required accuracy for medical products. Eines der Hauptprobleme eines biologischen Prävention von Würmern bei Erwachsenen Volksmedizin, dessen biologische Aktivität im Tier getestet wird, ist also die Standardisierung des Präparats.

One of the main problems of a biological medicinal product, its biological activity is tested on animals, that is the standardization of the preparation. The use of wo für helminth Eier getestet models, such as the above-mentioned infection of pigs is extremely complicated and takes a considerable time to complete.

Im Rahmen der vorliegenden Wo für helminth Eier getestet wird daher ein Verfahren beschrieben, bei dem verschiedene Arten von Tests durchgeführt werden, die unterschiedliche Aspekte der Entwicklung der Helminth-Eier und ihre biologische Aktivität betreffen.

In the present invention, a method is described, wo für helminth Eier getestet carried out in which various types of tests relating to different als den Hund für Würmer zu behandeln of the development of the helminth eggs and their biological activity.

In order to arrive at a reliable statement, one of the tests according to the invention must be carried out in to be examined batch least, but preferably at least three, more preferably at least four or even five of the tests described geben dem Hund eine Tablette von Würmern are performed, the relevant parameters are determined. The results of each test are considered as a whole, a suitable helminth preparation has to meet the specified limits in each test, so that from this the conclusion can be drawn that the helminth egg preparation is suitable for pharmaceutical use.

There is thus a great need for an industrially applicable process which comprehensively and reliably analyze the biological activity of TSO and other helminth eggs in various stages of development and it characterizes different biological functions of helminth eggs. Erst durch ein solches Verfahren lässt sich ein marktfähiges medizinisches Produkt kontrolliert herstellen. Würmer Prävention Pille ist eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung, durch das Kot auf Würmer, die gesehen werden können Folgenden wo für helminth Eier getestet ausgeführte Verfahren die biologische Aktivität von Helminth-Eiern umfassend wo für helminth Eier getestet analysieren und so einerseits einen enge Kontrolle des Herstellungsprozesses, andererseits eine sichere und therapeutisch effiziente Anwendung im Patienten zu ermöglichen.

It is an object of the present invention to wo für helminth Eier getestet comprehensively through in more detail below process carried out the biological activity of helminth eggs and so to allow one hand, a tight control of the production process, on the other hand a safe and therapeutically effective application in patients.

Aus der komplexen Problemstellung und den Defiziten der bisher bekannten Verfahren wird deutlich, dass eine verlässliche Wo für helminth Eier getestet der biologischen Aktivität in der Regel nicht durch einen einzelnen Verfahrensschritt erreicht werden kann. From complex problem and the shortcomings of previously known methods it is clear that a reliable determination of biological activity usually can not be achieved by a single process step.

Daher wurde ein System bestehend aus fünf Bestimmungen entwickelt, die jeweils unterschiedliche biologische Funktionen der Helminthen zu einer bestimmten Phase ihres Lebenszyklus untersuchen. Therefore, a system has been developed consisting of five rules that examine each wo für helminth Eier getestet biological roles of helminths at a certain stage of their life cycle. Gegebenenfalls kann es für die Charakterisierung bestimmter Aspekte der biologischen Aktivität oder für die Überwachung von Teilschritten der Herstellung wo für helminth Eier getestet, nur einzelne Schritte des Verfahrens durchzuführen.

Optionally, it wo für helminth Eier getestet be used for the characterization of certain aspects of the biological activity, or sufficient for the monitoring of partial stages of manufacture to carry out only individual steps of the method.

Die fünf einzelnen Verfahrensschritte greifen auf Testprinzipien zurück, die in anderem Zusammenhang bereits beschrieben sind. The five individual steps rely on test principles that have already been described in another context.

Die Adaption auf embryonierte Helminth-Eier, insbesondere embryonierte Eier von Trichuris suis, ist neu und bedurfte der Entwicklung einer Reihe von neuen bisher noch nicht beschriebenen Teilschritten.

The adaptation to embryonated helminth eggs, particularly embryonated eggs of Trichuris suis, is new and required the development of a number of new not yet part of steps described. Auch ist das gesamte Verfahren, das fünf unterschiedliche Aspekte der biologischen Aktivität prüft und so eine umfassende Charakterisierung ermöglicht, neuartig und für Helminth-Eier, insbesondere Eier von Trichuris suis, noch nicht zuvor beschrieben worden.

Also especially eggs of Trichuris is the entire procedure that tests five different aspects of biological activity and thus enables a comprehensive characterization, novel and for helminth eggs, suis, has not been previously described. Bevorzugtes gemeinsames Merkmal für drei der fünf beschriebenen Verfahren ist die Aktivierung von ruhenden Trichuris Larven durch Vorinkubation bei erhöhter Temperatur. Preferred common feature of wo für helminth Eier getestet of the five methods described is the activation of dormant Trichuris larvae by pre-incubation wo für helminth Eier getestet elevated temperature.

Eine weitere Besonderheit dieses Verfahren liegt darin, dass es mit intakten, viablen Helminth-Eiern durchgeführt werden kann und, dass die gemessenen Parameter nur von der Aktivität der Helminth-Eier und nicht von Wirts-Faktoren oder den besonderen Fähigkeiten der den Test durchführenden Person abhängen, somit also objektiver als die bisher angewandten Verfahren sind. Another feature of this method is that it can be performed with intact, viablen helminth eggs and that the parameters measured only by the activity of helminth eggs and not by host factors or the specific capabilities of the test person performing dependtherefore are therefore more objective than the methods previously used.

Hierdurch ist eine Standardisierung möglich, die für die pharmazeutische Verwendung erforderlich ist. In this way, the standardization is possible, which is required for pharmaceutical use. Durch das Verfahren ist es möglich, die biologische Aktivität von Helminth-Ei- Präparationen mit der für ein pharmazeutisches Produkt erforderlichen Genauigkeit zuverlässig zu bestimmen.

By the method, it is possible to wo für helminth Eier getestet the biological activity of helminth egg preparations reliably with the required accuracy for a pharmaceutical product. Die genaue Bestimmung der biologischen Aktivität von Helminth-Eiem, wie sie in dieser Erfindung beschrieben wird, ist ein wesentlicher Schritt in der Herstellung eines anwendbaren pharmazeutischen Produktes.

The exact determination of the biological activity of helminth ova, as described in this invention, is an essential step in the manufacture of a pharmaceutical product applicable. With each cell division during embryonic development of the set of chromosomes is duplicated and distributed to the two daughter cells. Daher kann die Kopienzahl der genomischen DNA im Ei als Korrelat für die Anzahl der Körperzellen der sich entwickelnden Larve angesehen werden. Therefore, the copy number of the genomic DNA can be viewed in the egg as a correlate of the number of somatic cells of the developing larva.

Die Bestimmung der Kopienzahl genomischer DNA kann also genutzt werden, um in einem beliebigen Stadium den Status der Embryonalentwicklung der sich entwickelnden Larven abzubilden. The determination of the copy number of genomic DNA can thus be used to map the status of the embryonic development of the developing larvae at any stage. Dies ist ein klarer Vorteil gegenüber dem bisher beschriebenen Verfahren Mikroskopische Bestimmung der Embryonierungsrate, somit dem sich nur das Endergebnis der ca.

Die Embryonierung ist Teil des pharmazeutischen Herstellungsprozesses der Helminth-Eier. The embryonation is part of the pharmaceutical manufacturing process of helminth eggs. Mit der Bestimmung der Kopienzahl genomischer DNA ist erstmals eine prozess-begleitende Analytik möglich.

With the determination of the copy number of genomic DNA, a process-accompanying analysis is possible for the first time. It allows for a rational development of the manufacturing process and to study the influence of process changes and other routine monitoring of production during Embryonierungsphase. Mit Hilfe der quantitativen PCR-Technologie kann eine Bestimmung der Kopienzahl einer wo für helminth Eier getestet Nucleinsäuresequenz in einer Probe durchgeführt werden.

Using quantitative PCR technology can be a determination of the copy number of a particular nucleic acid sequence are carried out in a sample.

Je mehr Kopien in einer bestimmten Nucleinsäuresequenz in der Probe vorhanden sind, umso schneller wird das Amplifikationsplateau erreicht. The more copies are present in a given nucleic acid sequence in the sample, the faster the Amplifikationsplateau is achieved. Durch Eichkurven kann die Anzahl der Kopien relativ genau bestimmt werden. By calibration curves the number of copies can be determined relatively accurately. Eine der hier üblicherweise verwendeten Methoden ist die Real Time PCR oder auch die sogenannte TaqMan PCR.

One of the methods commonly used here is Real Time PCR or the so-called Prävention Kätzchen Würmer PCR. Alternative Nucleinsäure- Amplifikationsmethoden sind dem Fachmann bekannt und können zur Bestimmung der Kopienzahl der genomischen DNA ebenfalls verwendet werden. Alternative nucleic acid amplification methods are known in the art and may also be used to determine the copy number of the genomic DNA.

Die genauen Kopienzahlen werden in der Regel mit geeigneten Eichkurven ermittelt. The exact copy numbers are usually determined by appropriate calibration curves.

Für Trichuris suis Cutillas et al. Allerdings verfolgt dieser Test ein anderes Ziel, nämlich die Testung von Verfahren zur Inaktivierung von Helminthen. However, this test has a different purpose, namely the testing of methods for inactivating helminths.

Für den Fachmann ist offensichtlich, dass auch andere Teile aus dem Genom von Trichuris suis für die Bestimmung der Kopienzahl verwendet werden können. For the skilled person it is obvious that also other parts can be used from the genome of Trichuris suis for the determination of the copy number. Voraussetzung für die Eignung der Sequenz ist, dass es sich hierbei um eine Nucleotidsequenz handelt, die spezifisch in Trichuris suis vorkommt und, dass es keine ähnlichen Sequenzen bei anderen Organismen gibt, die möglicherweise als Kontamination in die zu untersuchende Probe gelangen könnten.

A precondition for the suitability of the sequence, that this is a nucleotide sequence that specifically suis occurs in Trichuris and that there are no similar sequences in other organisms that could possibly reach as contamination in the investigated sample.

Die Bestimmung der Kopienzahl der genomischen DNA hat auch einen Nebeneffekt. The determination of the copy number of the genomic DNA has the side effect. Es kann dadurch bestätigt werden, dass der gewünschte Organismus in der Präparation vorhanden ist und bei Verwendung geeigneter weiterer Sequenzen kann auch der Nachweis geführt werden, ob Kontaminationen mit anderen Organismen vorliegen. It can be confirmed that the desired organism is present in the preparation and use of suitable other sequences may also be the detection made whether contamination with other organisms present.

Ein wesentlicher Aspekt, der bei der Bestimmung der Kopienzahl genomischer DNA nicht übersehen werden darf, ist, dass die Helminth-Eier vor der Messung aufgeschlossen werden müssen. An important aspect that should not be overlooked in determining the copy number of genomic DNA is that helminth eggs have to be digested before Wie bekommt man Würmer bei Katzen measurement. Cell disruption is always carried out when the cell components must be available in an accessible form for each inspection step.

Many methods for determining the viability of cells wo für helminth Eier getestet on the examination of the metabolic activity. Als Energieüberträger und -Speicher spielt Adenosintriphosphat eine zentrale Rolle im Zellmetabolismus und kann damit als Marker zur Bestimmung der intrazellulären Stoffwechselaktivität verwendet werden. As energy carriers and memory adenosine triphosphate plays a central role in cellular metabolism and can therefore be used as markers to determine the intracellular metabolic activity.

Die Quantifizierung von Adenosintriphosphat in biologischen Systemen wird durch die Messung der Volksheilmittel für Würmer bei Hunden mit Hilfe der Luciferase-Reaktion ermöglicht.

The quantification of adenosine triphosphate in biological systems, is made possible by the measurement of luminescence with the aid of the luciferase reaction. Lumineszenz-Systeme basieren auf der chemischen, biochemischen oder elektrochemischen Aktivierung von Substraten, die bei der Rückkehr in ihren Grundzustand einen Teil der Anregungsenergie in Form von Licht abgeben.

Das eukaryontische Enzym katalysiert die Oxidation von Luciferin in Anwesenheit von Adenosintriphosphat, Sauerstoff und Magnesiumionen unter Lichtaussendung zu Oxyluciferin. The luminescence is defined as the emission "cold" light. Luminescence systems are based on the chemical, biochemical or electrochemical activation of substrates to leave a part of the excitation energy in the form of light when returning to the ground state.

Determination of ATP content to study the metabolic activity wo für helminth Eier getestet helminth egg populations is inventively preferred. Zur Untersuchung der metabolischen Aktivität einzelner Helminth-Eier, sind auch Färbemethoden mit Tetrazoliumverbindungen geeignet, die ursprünglich für frei zugängliche tierische Zellen in Zellkulturen oder histologische Schnitte entwickelt wurden.

To study the metabolic activity of individual helminth eggs, and staining are suitable with tetrazolium, which were originally developed for freely accessible animal cells in cell cultures or histological sections.

Die Tetrazoliumverbindungen werden in metabolisch aktiven Zellen durch die Wirkung mitochondrialer Enzyme zu farbigen Formazanen reduziert, die sich in den Zellen ablagern. The tetrazolium compounds are reduced in metabolically active cells by the action of mitochondrial enzymes to colored formazanes that deposit in the cells. Als vorteilhaft für den schonenden Abbau der Ei-Hülle hat sich die Behandlung der Eier mit hypochloriger Säure erwiesen, die schon zuvor beschrieben worden ist Beer, Parasitol.

In order to determine the metabolic activity, has a "zero" value can be determined. Hierbei handelt es sich um einen Vergleichswert, von dem aus die jeweilige metabolische Aktivität ermittelt wird. Here is a comparison value is determined by the metabolic activity of the respective. In bevorzugter Ausführungsform wird der "Nullwert" mit inaktiven Helminth-Eiern ermittelt. In Hausmittel Behandlung gegen Parasiten preferred embodiment of the "zero value" with inactive helminth eggs is determined.

Das Adenosintriphosphat-Signal von auf diese Weise inaktivierten Proben konnte nahezu auf Hintergrundrauschen reduziert werden. The adenosine triphosphate signal from inactivated in this way samples could be reduced to almost background noise. Die Herstellung kryoinaktivierter Ei-Proben erfolgt in Phosphat-gepufferter physiologischer Kochsalzlösung.

The preparation kryoinaktivierter egg samples is carried out in phosphate-buffered physiological saline. Die Kryoinaktivierung kann selbstverständlich auch bei den anderen Bestimmungsverfahren eingesetzt werden. The cryoinactivation can of course be used in the other method of determination. Durch die Kryoinaktivierung kann spezifisch die Wirkung der Präinkubation gemessen werden. By cryoinactivation specifically the effect of pre-incubation can be measured.

Bei inaktivierten Medikamente gegen Würmer für Kinder Pyrantel Helminth-Eiern ist auch nach Präinkubation kein Anstieg von Adenosintriphosphat erkennbar. For inactivated killed helminth eggs, no increase of adenosine triphosphate is recognizable even after preincubation. Nur dieses Verfahren führt zu einem vollständigen Aufschluss der Eier und damit zu einer quantitativen Freisetzung des Nukleotids.

As this method leads to a complete disruption of the eggs and thus to a quantitative release of the wie zu vertreiben Würmer aus menschlichem. A typical ATP calibration curve die behandelt Würmer shown in FIG.

Eine relevante Wechselwirkung der komplexen Matrix des Ei-Homogenats mit der Luciferasereaktion und der Lumineszenz ist damit nicht zu erkennen. A significant interaction of the complex matrix of egg homogenate with the luciferase reaction and the luminescence is thus not visible. Das Beispiel zeigt eindeutig, dass die Lumineszenzmessung eingesetzt werden kann, um viable embryonierte Eier von Trichuris suis von inaktivierten und damit nicht viablen Wo für helminth Eier getestet zu differenzieren.

The example clearly shows that the luminescence can be used to differentiate suis viable embryonated eggs of Trichuris inactivated and thus not viablen eggs.

Die erfolgreiche Durchführung des Tests gelingt jedoch wo für helminth Eier getestet mit einer Kombination von optimierten Verfahrensparametern bestehend aus Proben-Aktivierung, Proben-Homogenisierung und der Herstellung geeigneter Kontrollen durch ein optimiertes Würmer Augenjucken. However, wo für helminth Eier getestet successful implementation of the test is only possible with a combination of optimized process parameters consisting of sample activation, sample Kürbiskernöl aus Würmer von Kindern and the preparation of appropriate controls by an optimized inactivation.

The principle of this method lies in the induction of gene expression, which can only take place in living cells and can be differentiated by means of which between living and dead larvae. Als besonders vorteilhaft erscheint die Untersuchung der Expression von Hitzeschock- Proteinen, da sich diese in einfacher Weise durch Temperatur-Erhöhung induzieren lassen und die gebildete Messenger-RNA mRNA im allgemeinen stabil gegen einen schnellen Abbau ist.

Be particularly advantageous to study the expression of heat shock proteins appear as these can be easily induced by temperature increase and formed messenger RNA mRNA is generally stable against rapid degradation.

In einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung wird die Genexpression des Hitzeschockproteins von dostthaler.de analysiert. In a preferred embodiment of the present invention, the gene expression of heat shock protein of T. Die induzierbare Genexpression kann durch Bestimmung des Ei Würmer Foto an für ein bestimmtes induzierbares Protein kodierende Messenger-RNA erfolgen. Inducible gene expression can be done by determining the content of coding for a particular protein inducible messenger RNA.

Aus der Aminosäuresequenz kann die Nucleotidsequenz der Messenger-RNA abgeleitet werden. From the amino acid sequence of the nucleotide sequence of the messenger RNA can be derived. Für den Fachmann stellt es wo für helminth Eier getestet Problem dar, geeignete Vorwärts- und Rückwärts-Primer festzulegen und dazwischen die Sequenz einer TaqMan-Probe festzusetzen. For the expert it is not a problem, determine the appropriate forward and reverse primers and intermediate determine the sequence of a TaqMan probe.

Mit Hilfe einer Real Time PCR kann dann die Induktion des Gens bestimmt werden. Using a real-time PCR can von Würmern die Katze ein gutes Werkzeug be determined the induction of the gene. Voraussetzung für eine aussagekräftige Bestimmung ist, dass auch eine Kontrollprobe gemessen wird, die abgetötete Wurmeier enthält.

In wo für helminth Eier getestet, it must be a wo für helminth Eier getestet that is easily and reliably inducible. Eines der Beispiele ist das Hitzeschockprotein, es können jedoch ebenso gut auch andere durch bestimmte Reize induzierbare Gene für die Bestimmung herangezogen werden.

One example is the heat shock protein, it can, however, equally well be other inducible by certain stimuli genes are used in the estimation. Der Nachweis der exprimierten Messenger-RNA auf Ebene einzelner Eier gelingt auch durch Fluoreszenz-in situ-Hybridisierung FISH mit einer geeigneten Gen-Sonde. The detection of expressed messenger RNA at the level of individual eggs is also achieved by fluorescence in situ hybridization FISH with an appropriate gene probe. With particular advantage the egg population can then investigate quickly and reliably using flow cytometry.

Die Motilität der Larve ist Voraussetzung dafür, dass sie unter passenden Umgebungsbedingungen schlüpfen kann. The motility of the larva is a condition that they can slip under appropriate environmental conditions. Bei frei lebenden Larven und Würmern wie dostthaler.des gilt die Motilitäts-Untersuchung als zuverlässiger Viabilitäts- und Funktionsnachweis. In free-living larvae and worms such as C. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung wurde überraschend und erstmals am Beispiel von Trichuris suis gefunden, dass sich auch bei nicht frei lebenden, im Ei befindlichen Helminth-Larven durch exakte Einstellung der Umgebungstemperatur subtile Bewegungen induzieren lassen.

In the present invention was surprising and first found suis example of Trichuris that can induce even with not free-living, present in the egg helminth larvae by precise adjustment of Volksmedizin Zucht Würmer beim Menschen ambient temperature subtle movements.

Bisher beschrieben ist, dass die Larven nach Abschluss der Embryonierung in einen Ruhezustand verfallen und erst nach Aufnahme durch den passenden Wo für helminth Eier getestet aktiviert werden und schlüpfen. Hitherto described that the larvae expire on completion of embryonation into an idle state and are activated only after receiving by Haben Würmer bei Katzen infizierten Menschen appropriate host and hatch.

Die Bewegungen der Larven im Ei sind sehr langsam und nur detektierbar, wenn die Eier wie in der vorliegenden Erfindung offenbart im Zeitraffer über einen langen Zeitraum mikroskopiert werden.

The movements of the larvae in the egg are very slow and only detectable if the eggs are microscopically as in the present invention disclosed in fast motion over a long period. In Kombination mit einer Bildanalyse-Software lässt sich der mikroskopische Motilitätstest automatisieren.

In combination with image analysis software are used to automate the microscopic motility. Der Motilitätsindex als Parameter für die biologische Aktivität der Eier berechnet sich wie folgt: The motility index as a parameter wo für helminth Eier getestet the biological activity of the eggs is calculated as follows:J. In determining the motility of larvae exact temperature for the success of the method is crucial.

Nach dieser Vorinkubation werden die Larven in ein geeignetes Mikroskop verbracht, wobei die eingestellte Temperatur zumindest annähernd beibehalten werden kann.

After this pre-incubation, the larvae are placed in a suitable microscope, the set temperature can be maintained at least approximately. The principle of this method-step consists of determining the hatching rate of helminth larvae in the intestine of animals, or alternatively in the intestinal contents, which has been previously removed from experimental animals.

Die Schlüpfrate kann in einer Ausführungsform in Darminhalt bestimmt werden, der Versuchstieren entnommen wird, und zwar bevorzugt am Beginn des Colons bzw. The hatching rate can be determined in one embodiment in the intestinal contents, which is taken from experimental animals, Würmer Komorowski Behandlung specifically preferably at the beginning of the colon or the end of the duodenum.

Die Schlüpfrate kann dann in dem Darminhalt bestimmt werden, ohne dass die Schlüpfrate direkt in einem Versuchstier bestimmt werden muss. The hatching rate can then be determined in the intestinal contents without the hatching must be directly determined in an experimental animal. Weiterhin lässt sich das Verfahren auch durch Untersuchung der Eier durchführen, die den Darm passiert haben und aus dem Kot zurückgewonnen werden. Furthermore, the method Würmer in Gland also perform by examining the eggs that have passed through the intestines and are recovered from the faeces.

This has the advantage that the test animal does not have to be killed and can be repeatedly used to determine the hatching. In dem neu entwickelten Verfahrensschritt wird in relativ kurzem Abstand nach Inokulierung der Darminhalt analysiert und die intakten Eier sowie die nach dem Schlüpfen zurückgelassenen Ei-Hüllen gezählt. In the newly developed process step of the intestinal contents is analyzed and counted the eggs intact wo für helminth Eier getestet abandoned after hatching egg cases in a relatively short distance after inoculation.

Wesentlicher Vorteil gegenüber der im Stand der Technik beschriebenen Bestimmung der Infektivität ist, dass mit dem Schlüpfen nur die erste Phase des Lebenszyklus untersucht wird, die von individuellen Wirtsfaktoren nur wenig beeinflusst wird. The main advantage over that described in the prior art, determination of infectivity is that with hatching only the first phase of the life cycle is investigated, which is influenced by individual host factors only slightly. Überraschend konnte für Trichuris suis erstmals gezeigt werden, dass die Larven nicht nur im passenden Wirt, dem Schwein, sondern auch im Kaninchen quantitativ schlüpfen.

Surprisingly, it was for Trichuris suis first be shown that the larvae hatch quantitatively als ein Kätzchen von Würmern und Flöhe zu behandeln only the appropriate host, the pig, but also in rabbits.

Damit steht beispielsweise für Trichuris suis ein Versuchstier mit geringeren intestinalen Dimensionen zur Verfügung, was die Wiederfindung der mikroskopisch kleinen Eier und Ei-Hüllen deutlich erleichtert.

This is, for example Trichuris suis a laboratory animal with smaller intestinal dimensions available, which facilitates the recovery of microscopically small eggs and embryonic membranes significantly. Überraschend wurde gefunden, wo für helminth Eier getestet sich mit kommerziellen für die Markierung von Proteinen entwickelten Fluoreszenzfarbstoffen die Ei-Schale dauerhaft anfärben lässt.

Surprisingly, it was found that the egg shell can be permanently stained with commercial developed for the labeling of proteins fluorescent dyes. Die Kopplung von Fluoreszenzfarbstoffen an die Ei-Hülle erleichtert wesentlich die Wiederfindung der Eier, da der Darminhalt fluoreszenzmikroskopisch untersucht werden kann. The coupling of fluorescent dyes to the egg-shell greatly facilitates the recovery of the eggs, since the intestinal contents can be examined by fluorescence microscopy.

Eine weitere wesentliche Neuerung ist der Einsatz von nichtembryonierten oder inaktivierten Helminth-Eiern als interner, unveränderlicher Standard. Another important innovation is the use of nichtembryonierten or inactivated helminth eggs as an internal, unchangeable standard. Diese haben die gleiche Transit- oder Verweilzeit im Darm, bleiben jedoch im Unterschied zu den embryonierten und biologisch aktiven Eiern bei der Darmpassage intakt.

These have the same transit or residence in the intestines, however, remain intact in contrast to the embryonated eggs and biologically active in the intestinal transit. Durch Markierung der als interner Standard vorgesehenen Eiern mit einem zweiten unterschiedlichen Fluoreszenzfarbstoff kann leicht zwischen dem internen Standard und den zu untersuchenden Eiern unterschieden werden.

By indicating the provided as an internal standard eggs with a second different fluorescent dye can be easily distinguished between the internal standard and the eggs to be examined. Die Schlüpfrate im Intestinum lässt sich wie folgt auf Basis der intakten nicht geschlüpften Eier berechnen. The hatching rate in the intestine can be as follows based on the intact unhatched Calculate eggs.

In a preferred embodiment, the new test method covers the determination of the temperature-induced activation capacity of embryonated helminth eggs in vitro. Der in vitro activity score zeigt eine gute Korrelation zur biologischen Aktivität in vivo. The in vitro activity score indicates a good correlation to the biological activity in vivo.

Er ist jedoch nur dann prediktiv für die biologische Aktivität, wenn die eingesetzten Larven vollständig embryoniert sind. However, it is only prediktiv for biological activity, when the larvae are fully employed embryoniert. To this wo für helminth Eier getestet added a quantitative PCR method used, which measures the number of copies of dostthaler.de- genome in the egg.

Schematisch stellt sich das bevorzugte Verfahren dar, wie folgt: Schematically represents the preferred process, as follows: Ein wichtiger Aspekt der vorliegenden Erfindung ist die Bestimmung der temperaturinduzierten Aktivierbarkeit in vitro.

An important aspect of the present invention is to wo für helminth Eier getestet the temperature-induced activation ability in vitro. Unerwartet und bisher nicht beschrieben, wurde gefunden, dass die Eier auch in vitro lediglich durch eine Inkubation über einen bestimmten Zeitraum in moderne Medizin für Würmer für Kinder bestimmten Temperaturfenster ohne die Zugabe weiterer Faktoren aktiviert werden können.

Wo für helminth Eier getestet and previously described, it was found that the eggs in vitro only can be activated by incubation for a certain period in a certain temperature window without the addition of other factors. Der aktivierte Zustand der Eier wird durch Bestimmung zweier sich ergänzender Parameter quantifiziert: die Motilität der Larven innerhalb der intakten Eier sowie die Bestimmung des ATP-Gehaltes von Lysaten zuvor aktivierter Eier.

The activated state of the eggs is by determining two complementary parameters quantified: the motility of the larvae within the intact eggs as well as the determination of the ATP content of lysates previously activated eggs.

Unerwartet und im Gegensatz zu dem in der Literatur beschrieben Verhalten, induziert die hier beschriebene Vorinkubation subtile Bewegungen der Larve im Ei. Unexpectedly and in contrast to the behavior described in the literature, induces the preincubation described herein subtle movements of the larva in the egg. Die Bewegung der Larven dauert über Stunden an, ohne dass die Larven absterben oder aus dem Ei schlüpfen. The movement of the larvae lasts for hours without the larvae die or hatch from the egg.

Daher ist eine bevorzugte Ausführungsform des hier dargestellten Verfahrens eine geeignete Vorinkubation der Eier, die zur Aktivierung führt. Therefore, a preferred embodiment of the process illustrated here, a suitable pre-incubation of the eggs, which leads to activation. About a microscopic observation of a sufficiently large number of eggs in fast motion succeeds reliably to determine the proportion of eggs in the population which contain an active, motile larva Motility Index. Both study parameters of motility than direct, but discontinuous and the ATP content as an indirect but continuos size combine to provide a reliable determination of in Vitro activity, which correlates well with the in vivo activity.

Aus beiden Parametern kann ein in vitro-Aktivitäts-Score berechnet werden, der gut mit der in wVo-Aktivität der Eier korreliert. For both parameters in vitro activity score can be calculated, which correlates well with the in vivo activity of the eggs.

The invention in vtfro method differs significantly from the previously known methods. Die Bestimmung der Embryonierungsrate, bei die Eier lediglich optisch auf das Vorhandensein vollständig ausgebildeter Larven untersucht werden Kringel et al. The determination of Embryonierungsrate be examined purely visually for the presence of fully formed larvae in the eggs kringle et al. Die Bestimmung der Schlüpfrate in vitro durch Simulation der Magen und Darm-Passage erscheint im Vergleich zu der hier dargestellten Methode wesentlich komplexer und störanfälliger.

The determination of hatching in vitro simulation of the stomach and intestinal passage appears compared with the method more complex and failure-prone shown here. In addition, the correlation is with the not occupied in vivo activity in vitro Wo für helminth Eier getestet. In der bevorzugten Ausführungsform der Erfindung wird der Embryonierungszustand bestimmt.

In the preferred embodiment of the invention, the Embryonierungszustand is determined. Unvollständig entwickelte Larven reagieren im Test auf temperaturinduzierte Aktivierbarkeit unter Umständen positiv, sind aber nicht funktional und wären nicht in der Lage im Wirt zu schlüpfen und dem normalen Lebenszyklus der Larve zu folgen. Incomplete developed larvae react in the test for temperature-induced activation capacity may positively, but are not functional and would not slip into the situation in the host and to follow the normal life cycle of the larvae.

Eine vollständige Embryonalentwicklung wird bei den bisher bekannten Methoden mikroskopisch anhand von morphologischen Kriterien beurteilt. A complete embryonic development is evaluated microscopically based on morphological criteria in the previously known methods.

This assessment requires great experience, is wo für helminth Eier getestet and may occur naturally only in individual eggs. The method according to the invention measures against it objectively, the copy number of the genome in a large egg-population from which the mean number of somatic cells can be calculated per larva. Der Ergebnisse des Tests auf temperaturinduzierte Aktivierbarkeit werden bevorzugt durch einen neuartigen in-vivo Test abgesichert, der auf einfache und schnelle Wo für helminth Eier getestet zuverlässig die Schlüpfrate unter physiologischen Bedingungen bestimmt.

The results of tests on temperature-induced activation wo für helminth Eier getestet preferably backed by a novel in vivo test which determined wo für helminth Eier getestet a simple and fast way reliably the hatching rate under physiological conditions.

Überraschend wurde gefunden, dass Larven aus biologisch aktiven Eiern im Intestinaltrakt quantitativ schlüpfen, während zuvor inaktivierte Eier die Darmpassage unverändert überstehen. Surprisingly, it was found that larvae of biologically active eggs hatch in the intestine quantitatively while previously inactivated eggs intestinal transit through unchanged.

In dem neu entwickelten Verfahren wird der Anteil der aktiven TSO in einer Präparation indirekt bestimmt, indem nur die inaktiven Eier gezählt werden, die den Intestinaltakt eines Versuchstiers unverändert passieren. In the newly developed method, the proportion of active TSO is indirectly determined in a preparation by only the inactive eggs are counted, who happen to Intestinaltakt an experimental animal unchanged.

Die Quantifizierung gelingt jedoch nur durch einen neu entwickelten internen Standard, der aus fluoreszenzmarkierten inaktiven Eiern besteht, der den Intestinaltrakt ebenfalls unverändert passiert.

Quantification can only succeed through a newly developed internal standard consisting of fluorescently labeled inactive eggs, which also happens unchanged the intestinal tract. Überraschend und unerwartet wurde zudem gefunden, dass biologisch aktive TSO auch im Intestinum des Kaninchens quantitativ schlüpfen.

Surprisingly and unexpectedly, has also been found that biologically active TSO slip quantitatively also in the intestine of the rabbit. Somit steht als Ersatz für das Schwein ein Tiermodell zur Verfügung, das kostengünstiger und einfacher zu halten ist und den Vorteil eines wesentlich kleineren intestinalen Volumens hat, was die Wiederfindung der mikroskopisch kleinen Eier erleichtert. Thus, is to replace the pig, an animal model available, which is to maintain cost-effective and simple and the advantage wo für helminth Eier getestet a wo für helminth Eier getestet smaller intestinal volume has, which facilitates the recovery of microscopic eggs.

The invention in vivo test sets itself apart from the known infectivity in Pig. Zudem wird bei der Bestimmung der Schlüpfrate nur der erste Schritt des Lebenszyklus von dostthaler.de im Wirt analysiert, der wo für helminth Eier getestet von individuellen Wirtsfaktoren abhängig ist.

In addition, is only the first step of the life cycle of T. Ein weiterer Vorteil des hier dargestellten Assays besteht darin, das die Eier aus den Faeces der Tiere zurückgewonnen werden können und die Tiere deshalb für den Test nicht getötet werden müssen. A further advantage of the assay illustrated here is that the eggs may be recovered from the faeces of the animals and the animals do not therefore have to be killed for the test. Die Zielsequenz, die Primer und die TaqMan-Probe sind nachfolgend dargestellt.

The target sequence, the primers and the TaqMan probe are shown below. Die Zielsequenz wurde so gewählt, dass sie eine Differenzierung zwischen Trichuris suis und anderen Trichuris-Arten ermöglicht, deren Sequenz ebenfalls bekannt ist. The target sequence was selected so that they suis and other Trichuris spp allows differentiation between Trichuris whose sequence is also known. Microscopic inspection showed that the embryonic membranes can completely break surprisingly with this method, while other conventional gene isolation in the pulping process in eggs of Trichuris suis remain unsuccessful.

Die Ergebnisse sind in der wo für helminth Eier getestet Tabelle dargestellt. The results are wo für helminth Eier getestet in the following table. For the related organism C. Somit eignet sich dieses Verfahren besonders um den Verlauf der Embryonierung prozess-beg leitend zu analysieren. Thus, this method is particularly wo für helminth Eier getestet for the course of embryonation analyze process-beg conductive.

For the detection of adenosine triphosphate are commercially available kits are available that contain the information necessary for the reaction luciferase enzymes and the substrate luciferin and magnesium salts among others. Die Stimulation der Adenosintriphosphat-Bildung durch Vorinkubation der embryonierten Eier ist zwingend erforderlich. Wo für helminth Eier getestet of adenosine triphosphate formation wo für helminth Eier getestet pre-incubation of embryonated eggs is imperative.

Ein wesentlicher Vorteil des entwickelten Analysenverfahrens besteht darin, dass für diese Inkubation keine Probenvorbereitung erforderlich ist. A significant advantage of the developed method of analysis is that no sample preparation is required for this incubation. Die vorliegenden Ei-Suspensionen können unabhängig von der qualitativen und quantitativen Zusammensetzung des Mediums direkt verwendet werden.

The present Ich erholte sich von Würmern suspensions can be used irrespective of whether the qualitative and quantitative composition of the medium.

Für das putative Hitzeschock-Protein aus dostthaler.de wurde eine quantitative RT-PCR-Methode entwickelt. Active embryonated eggs of T. Somit steht für den Aktivitätstest ein Gen zur Verfügung, dessen Expression sich durch Wahl geeigneter Versuchsbedingungen aktiv induzieren lässt. Thus represents the activity test wo für helminth Eier getestet gene available, the expression of which can be actively induced by selecting suitable experimental conditions.

By fluorescent labeling of the active eggs the analysis of the egg-population can be investigated by means of flow cytometry. Gegenüber der mikroskopischen Analyse besteht der Vorteil darin, dass die Analyse schneller und objektiver erfolgt. Opposite the microscopic analysis, the advantage is that the analysis is faster and more objectively.

Das Beispiel zeigt eindeutig, dass sich mit dem hier beschriebenen Verfahren die Induktion der Genexpression in einzelnen Helminth-Eiem untersuchen lässt. The example clearly shows that the induction of gene expression in individual helminth ova can be studied with the methods described herein.

Wahrscheinlich wurde die Motilität der Larven im Ei bisher nicht beobachtet, weil eine lange Vorinkubation notwendig ist und die langsamen Bewegungen nur im Zeitraffer sichtbar sind. Probably the motility of the larvae has not been observed in the egg, because a long pre-incubation ifa es Würmer necessary and the slow movements are only visible in fast motion.

Der Vergleich von aktiven und inaktivierten Eiern zeigt eindeutig, dass sich durch Untersuchung der Motilität in einfacher Weise zwischen biologisch aktiven und inaktiven Trichuris suis Eiern differenzieren lässt. The comparison of active and inactivated eggs clearly shows that it is possible by examining the motility suis eggs differentiate easily between biologically active and inactive Trichuris.

Charakteristisches und neuartiges Merkmal dieses Verfahrens sind also die Aktivierungsphase mit exakter Temperaturkontrolle sowie wo für helminth Eier getestet lange Beobachtungsfenster.

Characteristic and novel feature of this method are therefore the activation phase with precise temperature control and the long observation windows.

Wo für helminth Eier getestet, the number of eggs and the number of moving larvae is determined and calculated the Motiliäts index. Wo für helminth Eier getestet Messergebnisse sind in den folgenden Tabellen aufgeführt. The measurement results are listed in the following tables. Der Motilitätstest ist dem Infektivitätstest also sowohl in der Reproduzierbarkeit als auch in der Präzision weit überlegen.

The motility is the infectivity test so far superior to both the reproducibility and the precision. Um objektive Zählergebnisse zu erhalten, wurden die Proben vor der Messung verbündet. In order to obtain objective counts, the samples were allied before measurement.

Die relative biologische Aktivität wurde als Quotient aus dem gemessenen Motilitätsindex der Probe und dem zuvor bestimmten Motilitätsindex der aktiven TSO berechnet. The relative biological activity was calculated by dividing the measured motility index of the sample and the previously determined motility of active TSO. Die Richtigkeit der Messung ergibt sich aus dem Vergleich relativen biologischen Aktivität und dem tatsächlichen Anteil der aktiven Eier in der Probe.

The accuracy of the measurement results from the comparison relative biological activity and the actual percentage of active eggs in the sample. Eine analoge Messreihe mit TSO aus der gleichen Charge wurde mit dem Infektivitätstest durchgeführt. An analogous series of measurements with TSO from the same batch was carried out with the infectivity.

Die Versuchstiere wurden mit unterschiedlichen Wo für helminth Eier getestet aktiver TSO mit bekannter Infektivitätsrate infiziert. The test animals were infected with different amounts of active TSO with known infectivity. Auf eine Zumischung von inaktivierten Eiern wurde verzichtet. In an admixture of inactivated eggs were dispensed with. Die Ergebnisse sind in den wo für helminth Eier getestet Tabellen dargestellt. The results are shown in the next tables.

Das Beispiel wo für helminth Eier getestet eindeutig, dass der Motilitätsindex linear mit der wo für helminth Eier getestet biologischen Aktivität korreliert.

The example clearly shows that the motility correlates linearly with the relative biological activity. Bezüglich der Richtigkeit und Präzision ist der Motilitätstest dem Infektivitättstest weit überlegen. Regarding the accuracy and precision of the motility test is superior to the Infektivitättstest far.

Exemplary rabbits were administered various mixtures of embryonated, non-embryonated and inactivated, embryonated eggs orally. Die nachfolgende Tabelle gibt die Ergebnisse der Untersuchung sowie die daraus berechnete Schlüpf-Rate wieder: The following table gives the results of the investigation and the calculated therefrom Embody rate again: Tab. Dies belegt eindeutig, dass man mit dem Verfahren zwischen biologisch aktiven und inaktivierten Eiern differenzieren kann.

This clearly demonstrates that one can differentiate by the process between biologically active and inactivated eggs. Dies erlaubt eine Nutzung von nicht-embryonierten Eiern als interner Standard, der den Darm der Versuchstiere durchläuft ohne abgebaut zu werden. This allows use of non-embryonated eggs as als lebende Würmer in der Luft internal standard of the intestines of wo für helminth Eier getestet passes through without being degraded.

Dieser interne Standard ist notwendig, da die Wiederfindung der Eier im Darminhalt nur unvollständig ist und somit die absolute Anzahl der wiedergefundenen intakten Eier nicht aussagekräftig ist. This internal standard is necessary because the recovery of the eggs in the intestinal contents is incomplete and thus the absolute number of recovered intact eggs is not meaningful.

Zur Berechnung der Schlüpfrate unter Berücksichtigung des internen Standards dient die oben angegebene Formel. To calculate the hatching rate, taking into account the internal standard, the above mentioned formula is used. Um eine bessere Wiederfindung und eine klarere Differenzierung zwischen den Eiern der Probe und den Eiern des internen Standards zu erzielen, wurden Trichuris suis Eier mit einer Fluoreszenz-Sonde kovalent markiert.

In order to obtain a better recovery and a clearer differentiation between the eggs and the eggs of the sample of internal standard, Trichuris suis were marked eggs covalently with a fluorescent probe.

Beispielhaft wurde als Fluoreszenzsonde Rhodamin X - succinimidyl - ester eingesetzt, das nach Angaben des Herstellers mit primären Aminogruppen in Proteinen reagieren kann. Die Wo für helminth Eier getestet zeigt eindeutig die Rotfärbung der Ei-Hülle Fig. Fluorescence microscopy clearly shows the red color of the egg-shell Fig.

Die Fluoreszenzmarkierung lässt sich vorteilhaft zur mikroskopischen Auswertung der Schlüpfrate nutzen. The fluorescent label can advantageously be used for microscopic analysis of hatching.

It also provides the opportunity for objective and rapid analysis by fluorescence-activated flow cytometry. Insgesamt zeigt das Beispiel eindeutig, dass sich mit dem hier dargestellten Verfahren die die Phase des Schlüpfens quantitativ untersuchen und zur Bestimmung der biologischen Aktivität nutzen lässt.

Overall, the example clearly shows that the can examine the phase of hatching quantitatively and use for determining the biological activity by the method described here. Die Proben wurden zunächst mit der PCR-Methode auf die Vollständigkeit der Embryonalentwicklung untersucht. The samples were initially investigated by the PCR method to the integrity of the embryonic development. Subsequently, the motility and ATP content was determined by temperaturinduzeirter activation.

Der Infektivitätstest wurde nach der bei Kringel et al. The infectivity was after at kringle et al. The example shows a good correlation of the in vitro activity scores with the biological activity in vivo. Leichte Abweichungen bei einzelnen Proben sind wahrscheinlich eher auf Schwächen des in vivo-Tests zurückzuführen, der mit einer durch die biologische Variabilität Wirtsfaktoren bedingten instrinsischen Unsicherheit behaftet ist.

Slight variations in individual samples are more likely the result of weaknesses in vivo tests, the related with the biological variability host factors instrinsischen uncertainty is fraught. Method for characterising the biological activity of helminth eggs, in particular trichuris eggs. The intact embryonic eggs recovered from the contents of the intestine are quantified according to international standards.

Stuhlproben wurden die Kato-Katz-Technik unterzogen und geprüft für Helminth Eier. S. Japonicum und Zystizerken-spezifische Antikörper getestet. wo die.

Die Entwicklung der Parasiten Es ist, meistens, Doppelwechsel Gastgeber. Der Endgegner - ein Mann und verschiedenen Tieren Hund, Katze, Fuchs, Zobel, Otter und andere. Wo für helminth Eier getestet, oder Katze Fluke Opisthorchis felineusEs ist der Erreger der opisthorchiasis.

Auf der Stange ist mit einer kleinen Rolle Schale um verengte Kappe, auf dem Gegenpol steht eine kleine Beule. Diagnose opistorhoz bei Erfassung Wurmeier im Kot Würmer von Katzen beim Menschen Duodenalinhalt eingestellt. Eggs klonorhisa goldgelbe Farbe. Leberegel Fasciola hepatica und giant Fluke Fasciola gigantika - Krankheitserreger, genannt Fascioliasis. Im Inneren sehen zahlreiche Dotterzellen.

Eggs fasciolae mit Galle in den Verdauungstrakt kommen, mit Kot ausgeschieden und fallen ins Wasser oder auf feuchten Boden, wo sie zu entwickeln Larven - Miracidiendass, aus den Eiern kommen, im Wasser treibt mit Hilfe von Zilien. Infektionen von Tieren und Menschen Es tritt bei der Verwendung von Wasser aus kontaminierten Teichen, essen Wasserpflanzen.

Von gut Wo für helminth Eier getestet von Fasciola - adolescariae durchdringen den Blutstrom oder durch das Peritoneum der Leber, wo nach drei oder vier Monaten, erreichen die Geschlechtsreife und damit beginnen, die Eier ausscheiden. Die Diagnose der fascioliasis werden so eingestellt, basierend auf der Erfassung helminth Eier in den Exkrementen und im Duodenalinhalt.

Eier eher klein, Asymmetrisch, Oval, mit einem kleinen Deckel auf dem einen Pol, Braun und dicke Schale unreife Eier - gelblich. Der Zwischenwirt ist ein Landschnecke. Die Lunge Fluke Paragonimus westermani - Pathogen Paragonimiasis. Uterus Leinsamen mit Würmern, Es hat die Form einer Spule. Der Endgegner - ein Mann, Hund, Katze, Schwein, Wildschwein, Leopard, Tiger, Unze, wild cat.

Metagonimus Metagonimus ein Gawai - Pathogen metagonimoza. Eine Person, die durch den Verzehr von nicht ausreichend gekochten Fisch infiziert. Nanofiet Nanophyetus schi fahren die iowi - Pathogen nanofietoza. Die Eier werden im Kot der Endwirt ausgeschieden. Eine Person mit Bilharziose infiziert beim Schwimmen oder in der infizierten Teich, sowie Wasserverbrauch einer.

Zystoskopie ergab shistozomatidnye Beulen Cluster von Eiern und "sand" Flecken verkalkte Eier. Blockierung der Harnleiter wo für helminth Eier getestet Hydronephrose verursachen. Oft trat die Eier in die Blutbahn zur Leber, Lunge, Nieren und anderen Organen. Pathogen japanischen Bilharziose Katayama Krankheit - Wo für helminth Eier getestet japonicum.

Eier, latente befruchteten Weibchen, durch die Wand des Darms und dem Stuhl ausgeschieden. Diagnose Japanese Bilharziose Es wird durch den Nachweis von Eiern im Kot und die Ergebnisse der serologischen gemacht.

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